Качественный анализ ПЦР на гепатит С, расшифровка результатов

Гепатит С относится к вирусному поражению печени. Часто это заболевание переходит в хроническую форму. Человек заражается через кровь, половым путем, возможно инфицирование от матери к плоду.

Для диагностики этой болезни выполняют анализ крови на ПЦР (полимеразную цепную реакцию). Исследование на определение вируса бывает количественное и качественное.

Качественный анализ ПЦР на гепатит С помогает обнаружить возбудителя в крови. Количественный — показывает количество этого вируса.

Что такое качественный анализ ПЦР?

Он используется для установки диагноза хронического вирусного гепатита С и определения генотипа его возбудителя. Метод ПЦР относится к высокоточному способу молекулярной диагностики. Он способен определять даже малую концентрацию имеющегося вируса (10 — 500 МЕ/мл).

При острой фазе болезни качественный анализ определяет наличие патологии уже через 1 — 2 недели после заражения. В этот период специфические антитела к вирусу могут еще не выработаться, и проведение иммуноферментного анализа (ИФА) может быть бесполезно. Этот возбудитель имеет высокую мутационную активность. При помощи качественного метода ПЦР определяют, какой генотип болезни развивается у данного пациента.

Когда делается качественный ПЦР на гепатит С?

Качественный ПЦР проводится:

  • При обнаружении антител при ИФА.
  • Для диагностики сопутствующих поражений печени. Иногда выявляются смешанные инфекции: одновременно заражение гепатитом B, C и D.
  • Для выявления генотипа возбудителя с последующим определением тактики лекарственной терапии.
  • Чтобы верифицировать диагноз.
  • Для оценки качества лечения и изменений на фоне медикаментозной терапии.

К преимуществами качественного метода исследования относится высокая чувствительность методики, большая скорость диагностики (анализ выполняется от 8 до 24 часов) и выявление скрытого течения заболевания.

Качественный анализ выполняют сразу после обнаружения антител, затем на 4, 12, 24 неделе противовирусной терапии. Потом повторяют через 6 месяцев после завершения лечения и ежегодно.

Анализ ПЦР на гепатит С обязательно выполняют беременным женщинам, донорам, при подготовке к любому оперативному вмешательству.

Группы риска

К людям, находящимся в группе риска инфицирования вирусным гепатитом C, относятся:

  • Наркоманы, которые вводят наркотики парентерально (внутривенно или внутримышечно).
  • Лица нетрадиционной сексуальной ориентации.
  • Дети, рожденные от матерей наркоманок или болеющих гепатитом С.
  • Больные хронической почечной недостаточностью и постоянно находящиеся на гемодиализе.
  • Лица после трансплантации внутренних органов: печени, почек, сердца.
  • Пациенты, нуждающиеся в частых оперативных вмешательствах, заборах крови и инъекциях.
  • Люди, которые ведут беспорядочную половую жизнь.
  • Врачи, медработники, постоянно контактирующие с кровью.
  • Люди, делающие татуировки.

По данным ВОЗ хроническим вирусным гепатитом C в мире страдают 70 миллионов человек, ежегодно умирают от этого заболевания 399.000 людей. 25 млн являются носителями вируса.

Хронические гепатиты могут протекать абсолютно бессимптомно. При начальной стадии заболевания отсутствуют признаки поражения печени либо общие проявления интоксикации.

Необходимо как минимум один раз в год проверять кровь на вирусные гепатиты B и C. Врачи, медицинские сестры, военнослужащие, полицейские, работники силовых структур проходят такое исследование два раза в год.

Методика проведения качественного ПЦР

Для выполнения качественной полимеразной цепной реакции у пациента берется кровь из вены. Затем проводится лабораторное исследование следующим образом: в исследуемый материал добавляют праймеры (короткие химически синтезированные олигодезоксирибонуклеотиды) или специальные ферменты.

С помощью специального прибора охлаждают и нагревают пробирки с кровью. Создается специальная искусственная среда, в которой размножается генетически материал возбудителя до такой степени, что его можно визуально исследовать. При качественном анализе происходит копирование цепей, которые соответствуют вирусной RNA. Затем делается заключение о наличии вируса гепатита в организме пациента.

Перед проведением качественной ПЦР на гепатит С перед исследованием необходимо:

  • Избегать физических нагрузок за день до сдачи анализа.
  • Прийти натощак, не употреблять пищу за 8 — 10 часов до сдачи анализа.
  • Производить забор крови в первой половине дня.
  • За два дня до проведения диагностики исключают жирную, жареную пищу, алкоголь.

Суть качественной полимеразной цепной реакции заключается в многократном увеличении фрагментов вирусных частиц.

Расшифровка результатов анализа

После проведения качественной ПЦР, в бланке анализа пишется «обнаружено» или «не обнаружено».

Отрицательный результат наблюдается, когда вирус присутствует в крови в малом количестве и чувствительная тест-система не смогла определить концентрацию. Такое наблюдается при недавнем заражении либо при длительно проводимой противовирусной терапии.

Обнаружено В исследуемом материале определяется РНК HCV (возбудитель). Диагноз гепатита C подтвержден.

 

Не обнаружено Возбудитель отсутствует или количество недостаточно для определения.

 

Расшифровка качественного анализа ПЦР не представляет затруднений. Однако при получении положительного результата необходимо обратиться к гепатологу или инфекционисту для уточнения диагноза и назначения противовирусной терапии.

Что делать, если ПЦР на гепатит С положительный?

Иногда выявляются ложные показатели качественной ПЦР.

Это бывает при некоторых ситуациях:

  • Воздействие на исследуемые жидкости высокой температуры.
  • Погрешности работы лаборанта или медицинской сестры.
  • Постоянное употребление пациентом антикоагулянтов.
  • Присутствие в крови веществ — ингибиторов ПЦР, которые затрудняют проведение полимеразной реакции.

Если нет никаких сомнений в результате, либо повторные проведенные исследования показали такой же результат, то пациенту ставится диагноз хронического вирусного гепатита C.

Для определения степени поражения и нарушения работы печени, выполняют дополнительные методы обследования: клинические анализы, определение уровня билирубина, трансаминаз, общего белка, щелочной фосфатазы, гамма – глутамилтрансферазы, УЗИ и биопсию печени. Проводится количественная ПЦР диагностика и генотипирование вируса.

Положительный эффект при лечении вызывает применение рибавирина, интерферона — альфа. Обязательно назначаются гепатопротекторные препараты: эссенциале, гептрал, урсосан, иммуномодуляторы.

Пациентам ни в коем случае нельзя отказываться от противовирусного лечения. Это чревато развитием серьезных осложнений, которые приведут к летальному исходу.

Качественная полимеразная цепная реакция относится к высокоточным анализам. Диагностика с помощью ПЦР выявляет даже небольшое количество возбудителя. Это приводит к раннему диагностированию гепатита С и своевременному назначению лечения. При адекватной терапии полное выздоровление наступает у 20% больных.